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动物传染病学(实践)
一、实训目的
通过本单元课业训练指导,以期达到以下实训目的:(1)培养学生独立思考和设计的能力。学生实习前查阅相关资料,自己设计实验。(2)提升动手能力:学生分小组,自己动手开展实验。(3)提升学生分析问题和解决问题的能力。学生对实验中遇到的问题自己进行讨论和分析,在老师的引导下,寻找解决问题的方案;学生对实验结果进行认真分析和总结。(4)以四川主要的规模化养殖动物猪、鸡的传染病的实验室诊断为例,培养和掌握动物传染病的实验室综合诊断技能。
三、实验考核要求
(1)教学实习前认真查阅有关资料,然后以组为单位提交一份实验设计;(2)教师审核和修改实验设计,与学生商量后确定每组的实验方案;(3)每组按实验方案的内容准备实验材,实验材料准备完毕方可,进行正式实验;(4)整个实验过程,以学生为主,学生自主设计,自己动手,收集整理实验数据;
四、实验内容
1. 猪细菌性病的诊断实践
1.1.实验方案的撰写:查阅文献,独立撰写“猪细菌病的诊断”综合实验方案;
1.2.材料的准备:
(1)临床病料收集:收集临床发病猪病料(或病猪),用于分离细菌。
(2)培养基的制备(鲜血培养基、普通培养基、麦康凯培养基、TSA培养基等);
1.3.临床发病猪的剖检;
1.4.细菌的培养与鉴定:
(1)病料的接种(用不同的培养基,同时进行心、肝、脾、肺、肾、肠道的细菌接种);
(2)细菌的培养(厌氧、需氧);
(3)细菌的鉴定(培养特性鉴定、染色特性鉴定、16sRNA鉴定、致病性鉴定、耐药性鉴定,等。)
1.5.实习报告的撰写:总结实验结果,分析实验数据,讨论分析实验结果,形成综合的实验报告
2. 鸡病毒病的实验室诊断实践
2.1.实验方案的撰写:查阅文献,独立撰写“鸡呼吸道病毒的分离鉴定”综合实验方案;
2.2.材料的准备:
(1)病料收集:收集临床发病鸡病料(或病鸡),用于分离病毒。
(2)鸡胚的孵化:购买SPF鸡胚,孵化至9-11日龄;
2.3.临床发病鸡的剖检;
2.4.病毒的分离与鉴定:
(1)病料的采集(呼吸道疾病一般采集气管、肺);
(2)病料的处理(研磨、反复冻融、离心、过滤除菌);
(3)病料的鸡胚接种(绒毛尿囊腔、绒毛尿囊膜)
(4)病毒的鉴定(培养特性的鉴定如鸡胚死亡时间,胚体出血情况,胚体发育情况、尿囊液颜色的变化等;理化特性的鉴定如血凝性;核酸鉴定:PCR或RT-PCR扩增靶基因、PCR产物的测序、序列比对等
2.5.实习报告的撰写:总结实验结果,分析实验数据,讨论分析实验结果,形成综合的实验报告
五、实习指导书或参考书或参考网站
教材名称、作者(译者)、出版社、出版时间
1.《兽医传染病学实验指导》,陈溥言(南京农业大学)主编,中国农业出版社,2015.
2.《兽医微生物学实验指导》,姚火春(南京农业大学)主编,中国农业出版社,2002.
3.OIE: Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals (http:// www.oie.int/en/standard-setting/terrestrial-manual/access-online/)